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Scarpe New Balance 991,59 EUR,NewB0394,gastrointestinali le funzion,quella di acetil CoA era molto meno

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Acil-CoA carbossilasi è stato purificato dal supernatante 140,000g dell'estratto Uropigio oca mediante Sepharose 4B-CL gel filtrazione, precipitazione di solfato di ammonio, e la cromatografia di affinità con monomerica avidina-Sepharose 4B-CL. L'enzima purificato ha mostrato un pH ottimale di 8 e aveva un'attività specifica compresa 2-8 mmol / min / mg di proteina per acetil-CoA. Dodecil solfato di sodio-elettroforesi mostrato una singola banda corrispondente ad un peso molecolare di 238.000. Attività carbossilasi è stata stimolata triplice di 20 mm citrato. Attività massima è stata osservata da 25 mm bicarbonato di 10 mm Mg2 + 3 mm ATP, e 1 e 2 mm acil-CoA. L'enzima carbossilati acetil-CoA, propionil-CoA, butirril-CoA, pentanoile-CoA e esanoile-CoA, con una V di 8,8, 5,7, 0,9, 0,04 e 0,03 mmol / min / mg, rispettivamente; Valori di Km per i cinque esteri CoA erano molto simili. I prodotti carbossilati di questi substrati sono stati analizzati mediante cromatografia liquida ad alta prestazione. Questo carbossilasi è stato inibito da ioni sodio e cloro. Modificazione chimica dell'enzima con piridossal-5'-fosfato ha dimostrato l'inibizione di attività che era tempo e concentrazione dipendente. L'inibizione è stato invertito per diluizione tranne quando trattati con sodio boroidruro prima della diluizione. Acetil-CoA parzialmente (40%) protetto da inibizione dell'enzima, che 3'-dephosphoacetyl-CoA, che ha mostrato un Km 3,5 volte quella di acetil-CoA, era molto meno efficace nel proteggere l'enzima contro inattivazione da piridossal fosfato. Questi risultati suggeriscono che il gruppo ε-amminico di un residuo di lisina è coinvolto nel legame acetil-CoA attraverso l'interazione con il 3'-fosfato. Modificazione chimica dell'enzima con fenilgliossale ha mostrato l'inibizione di attività che era tempo e concentrazione dipendente. Tuttavia, nessuno dei substrati protetto da inattivazione dell'enzima; citrato parzialmente protetto l'enzima, eventualmente modificando la configurazione dell'enzima. L'analisi degli amminoacidi della proteina ha mostrato somiglianze con carbossilasi purificati dagli altri animali colpire. Analisi a doppia diffusione Ouchterlony con antisiero di coniglio preparato contro l'enzima ghiandola ha mostrato fusione di linee di precipitazione con gli enzimi di fegato d'oca e fegatini di pollo. New Balance 991 Saldi Questi risultati sostengono fortemente la conclusione che la Uropigio, che sintetizza acidi multimethyl-ramificato, impiega lo stesso carbossilasi come quella Scarpe New Balance 991 presente in altri tessuti.
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Vincenzo Di Nicola

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